Biólogo Molecular Héctor Gabriel Avila
Echinococcus granulosus sensu lato en Argentina: obtención de mapa epidemiológico y desarrollo de un sistema de diagnóstico molecular aplicable en programas de control de la Hidatidosis.
El
miércoles 13 de marzo de 2019, en el aula 28 de la Escuela de Graduados de la
Facultad de Ciencias Veterinarias de la UBA, el Licenciado en Biología Molecular
Héctor Gabriel Avila, obtuvo el grado de Doctor de la Universidad de Buenos
Aires en Ciencias Veterinarias.
Su
tesis “Echinococcus granulosus sensu lato en Argentina: obtención de
mapa epidemiológico y desarrollo de un sistema de diagnóstico molecular
aplicable en programas de control de la Hidatidosis”, la realizó en el Centro
de Investigación en Zoonosis de la Provincia del Chubut y en el Instituto de
Microbiología y Parasitología Médica de la Universidad de Buenos Aires.
Su
directora de tesis fue Laura Kamenetzky, Licenciada en Biología y Doctora de la
Universidad de Buenos Aires. Investigadora Independiente del CONICET y del
Instituto de Microbiología y Parasitología Médica de la UBA. Su Co-Director fue
el Veterinario Oscar Jensen del Centro de Investigación en Zoonosis.
Fueron
sus jurados las doctoras María Celina Elissondo de la Universidad Nacional de
Mar del Plata, Miriam Mabel Ribicich, de la Universidad Nacional de Buenos
Aires y María Cecilia Venturini de la Universidad Nacional de La Plata
Resumen
La equinococcosis quística (EQ) es una
enfermedad desatendida que afecta al ganado y humanos, especialmente a
poblaciones de áreas remotas con economías y servicios de salud frágiles. El
agente causante es el parásito cestode Echinococcus granulosus sensu lato
(s. l.) compuesto por cinco especies y ocho genotipos: E. granulosus sensu
stricto (G1 y G3), E. equinus (G4), E. ortleppi (G5), E.
canadensis (G6, G7, G8 y G10) y E. felidis. Estas especies/genotipos
difieren en la especificidad de hospedador, patogenicidad, antigenicidad,
períodos pre-patentes, entre otras características. En Argentina circulan tres
especies: E. granulosus s.s. (G1 y G3), E. ortleppi (G5) y E.
canadensis (G6 y G7). El objetivo de la presente tesis fue elaborar un mapa
epidemiológico de los genotipos/especies circulantes de E. granulosus s. l.
en Argentina y desarrollar dos técnicas de copro-LAMP (Loop-Mediated Isothermal
Amplification) para ser aplicados en estudios de epidemiología molecular y
diagnóstico en hospedador definitivo.En el presente trabajo de tesis se
analizaron por amplificación en cadena de la polimerasa (PCR) de una región del
gen mitocondrial cox 1, con posterior secuenciación y alineamiento con
secuencias cox1 de referencia de especies/genotipos de E. granulosus s. l.,
98 muestras provenientes de diferentes hospedadores y zonas geográficas de la
Argentina, informándose por primera vez la presencia de la especie E.
canadensis (G6) en humanos provenientes de San Juan, San Luis y Salta; y E.
ortleppi (G5) en la provincia de San Juan, además, se ampliaron los datos
para las provincias de Buenos Aires, Córdoba, Chubut, Río Negro, Catamarca y
Santa Fe, donde el número de casos analizados era escaso. Se optimizó la
extracción de ADN de protoescólices, capa germinal, adultos, heces y esputo
para análisis moleculares. Para el análisis de las muestras, se implementaron
caminos alternativos a la secuenciación de productos PCR para ser implementados
en estudios de epidemiología molecular. Se realizó la validación de ensayos de
digestión de dichos productos por la enzima AluI, con el objetivo de
diferenciar a la especie E. granulosus s. s. del resto de especies, y se
utilizó el análisis de curvas de alta resolución de fusión (HRM, por su término
en inglés: High Resolution Melting) para la identificación y diferenciación
entre las especies E. granulosus s. s., E. ortleppi, y E. canadensis.
Respecto al diagnóstico en el hospedador definitivo en el presente trabajo se
pusieron a punto y diseñaron dos sets de primers LAMP, el primero consta de
tres sub-sets de primers para la identificación de las especies E.
granulosus s.s., E. ortleppi y E. canadensis, por separado, el cual fue
puesto a punto para la identificación de especies a partir de heces, con el
objetivo de ser empleados en estudios de epidemiología molecular. Por último,
se diseñó y puso a punto un set de primers LAMP capaz de detectar las tres
especies circulantes en Argentina de forma simultánea en una sola reacción, con
el objetivo de ser propuestos como una nueva herramienta alternativa para el
diagnóstico. Los resultados obtenidos ampliaron los conocimientos sobre la
epidemiología molecular de E. granulosus s. l. en Argentina, los cuales son
útiles teniendo en cuenta las diferencias existentes entre las especies que
conforman el complejo. Por último, se puso a punto un sistema de diagnóstico
basado en LAMP con valores de sensibilidad analítica de entre 10 fg y 100 fg de
ADN, lográndose reacción positiva a partir de ADN extraído de heces caninas a
las que se agegó un solo parásito adulto. La reacción permitió detectar ADN de
las especies de E. granulosus s. l. circulantes en nuestro país y resultó
específica, dado que no se obtuvieron productos LAMP con ADN de perro, Dipylidium
caninum, Toxocara canis, Toxocara cati, Toxascaris leonina, Ancylostoma
caninum, Taenia hydatigena y Tenia crassiceps. Este sistema diagnóstico
podría ser implementado en zonas endémicas con bajos recursos y equipamientos.
Ambos resultados contribuyen de forma activa al conocimiento básico y aplicado
de la EQ en la República Argentina.
Director:
Kamenetzky, Laura
Codirector:
Jensen, Oscar
Citación:
Avila, Héctor Gabriel; Kamenetzky, Laura; Jensen, Oscar; Echinococcus
granulosus sensu lato en argentina: obtención de mapa epidemiológico y
desarrollo de un sistema de diagnóstico molecular aplicable en programas de
control de la hidatidosis; 13-3-2019
El
correo del Doctor Gabriel Avila
hectorgabrielavila@gmail.com
2004 – CHILLAN – CHILE
Veterinaria IRIS OLIVIA VIVALLO CUEVAS
Veterinaria IRIS OLIVIA VIVALLO CUEVAS
EVALUCION DE LA VACUNA EG95 CONTRA HIDATIDOSI EN
OVINOS
Tesis presentada por IRIS OLIVIA
VIVALLO CUEVAS presentada a la Faculta de Medicina Veterinaria de Chillan,
Universidad de Concepción, Chile, para optar el título de Medico Veterinario en
el año 2004.
En año 2003 se evaluó un ensayo realizado
en la Facultad de Veterinaria de Chillán, ubicado en la VIII región de Chile,
entre los años 2001 por IRIS OLIVIA
VIVALLO CUEVAS, con la dirección de los profesores Luis Rubilar de la cátedra de Parasitología de Chillan y
Verónica Madrid de Inmunología de Concepción.
Los ovinos de raza Suffolk a la edad de
corderos recibieron dos dosis de vacuna EG95 con el adyuvante Quil A, producida
en el Ag Reserch de Nueva Zelandia, realizándose el desafío con proglótidos de E. granulosus obtenidos de perros de la región del Alto
Bío Bío.
A la necropsia, realizada 13 meses después
de la segunda dosis, se detectaron 291 quistes en los 10 ovinos testigos y 3
quistes en los doce ovinos vacunados.
2018
– TANDIL - ARGENTINA
Veterinaria Cristina Elizabeth Rau,
Veterinaria Cristina Elizabeth Rau,
Análisis
epidemiológico de Hidatidosis bovina en la Comarca Andina del Paralelo 42º.
Tesina
de la Orientación de Sanidad Animal, presentada para optar al grado de Veterinario
de la estudiante Cristina Elizabeth Rau,
de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional del Centro,
de Tandil, Provincia de Buenos Aires.
Su
directora fue la Dra Mariana A. Rivero y su tutor el Medico Veterinario Ricardo
Abel Fernández del Programa de Control de la Hidatidosis de la provincia del
Chubut.
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